AB Sciex 4000液質(zhì)聯(lián)用儀是將液相色譜儀與質(zhì)譜儀聯(lián)用的儀器,主要用于樣品的定性定量分析。其工作原理是將液相色譜分離方法與質(zhì)譜法相結(jié)合。樣品通過液相色譜分離后的各個(gè)組分依次進(jìn)入質(zhì)譜檢測(cè)器,在離子源被電離,產(chǎn)生帶有一定電荷、質(zhì)量數(shù)不同的離子。這些離子在電磁場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng)行為不同,因此可以通過質(zhì)量分析器按不同質(zhì)荷比(m/z)把離子分開,得到依質(zhì)荷比順序排列的質(zhì)譜圖。通過對(duì)質(zhì)譜圖的分析處理,可以得到樣品的定性和定量結(jié)果。
1、液相色譜系統(tǒng)
進(jìn)樣系統(tǒng):現(xiàn)代LC-MS通常使用六通閥或自動(dòng)進(jìn)樣器,這些裝置具有密封性好、死體積小、重復(fù)性好的特點(diǎn),確保進(jìn)樣時(shí)對(duì)系統(tǒng)的壓力和流量影響小。
輸液系統(tǒng):包括貯液器、高壓輸液泵、過濾器、脫氣裝置和梯度洗脫裝置。高壓泵提供恒定無脈動(dòng)的流速,過濾器去除微小雜質(zhì),脫氣裝置防止氣泡干擾檢測(cè)器工作,梯度洗脫裝置實(shí)現(xiàn)不同溶劑比例的混合。
分離系統(tǒng):由色譜柱、連接管和恒溫器組成。LC-MS常使用窄徑柱以提高霧化效果,粒徑一般為3.5µm或5µm。
2、接口與離子源
接口技術(shù):LC-MS的接口技術(shù)難度較大,因?yàn)樾枰獙⒁合嗌V中的液體流動(dòng)相轉(zhuǎn)化為質(zhì)譜檢測(cè)所需的氣體離子。常見的電離源有電噴霧電離源(ESI)和大氣壓化學(xué)電離源(APCI),兩者均在大氣壓下進(jìn)行離子化過程。
電噴霧電離源(ESI):通過高壓使流動(dòng)相形成帶電液滴,隨后蒸發(fā)并碎裂成更小的液滴,最終形成氣相離子。
大氣壓化學(xué)電離源(APCI):利用電暈放電啟動(dòng)一系列氣相反應(yīng)以完成離子化過程。
3、質(zhì)量分析器
單聚焦質(zhì)量分析器:結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,但分辨率較低。
雙聚焦質(zhì)量分析器:通過加入扇形電場(chǎng)提高分辨率。
四極桿濾質(zhì)器:適用于LC-MS,掃描速度快。
離子阱:可以存儲(chǔ)離子,適用于特定分析。
飛行時(shí)間質(zhì)量分析器:適合大分子分析,具有高分辨率。
4、檢測(cè)器
主要包括電子倍增器、光電倍增器和微通道板等,用于接收離子束。
5、真空系統(tǒng)
質(zhì)譜儀的離子源、質(zhì)量分析器和檢測(cè)器必須在高真空狀態(tài)下工作,以減少本底干擾和避免不必要的離子-分子反應(yīng)。
6、電氣系統(tǒng)
包括穩(wěn)壓電源UPS,保證儀器電源電壓穩(wěn)定持續(xù),特別是在停電時(shí)對(duì)儀器的影響最小。
7、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)
用于采集、處理和分析質(zhì)譜數(shù)據(jù),提供定性和定量結(jié)果。