安捷倫1260液相色譜儀是一種高效的分離和分析技術，通過在固定相（色譜柱）和流動相（溶劑）之間相互作用，實現(xiàn)對混合物中成分的分離和檢測。HPLC在各種領域的科學研究和工業(yè)生產中發(fā)揮著重要作用。其基本原理是利用化合物在固定相（通常是填充在色譜柱中的吸附劑）和流動相（溶劑）之間的分配系數(shù)差異，實現(xiàn)化合物的分離。樣品混合物在色譜柱中受到不同程度的吸附和解吸作用，從而在柱中分離成各個成分。檢測器檢測這些分離的化合物，并生成相應的信號。
1、流動相準備
溶劑純度：使用的溶劑必須達到色譜純（LC）級別。
過濾脫氣：所有溶劑在使用前需經過0.45微米濾膜過濾，并通過超聲脫氣10-20分鐘。這有助于去除雜質和溶解的氣體，防止氣泡影響泵和檢測器的性能。
溶劑連接：確保A管連接有機相，B管連接水相，并且溶劑完q浸沒吸濾頭。
2、設備操作
開機連接：打開HPLC工作站（包括計算機軟件和色譜儀），連接好流動相管道和檢測系統(tǒng)。
沖洗泵閥：如果長時間未用或更換新的流動相，需先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵時，直接在泵的出水口用針頭抽取溶劑；沖洗進樣閥時，在控制界面中點擊purge后再點擊start，速度不要超過10 ml/min。
調節(jié)流量：初次使用新流動相時先測試壓力，流速不宜過大，通常不超過2000 psi，然后選擇合適的流速并走基線，觀察基線情況。
3、方法設計
設定方法：在控制界面選擇或創(chuàng)建合適的走樣方法，包括進樣前的穩(wěn)流、基線歸零、進樣閥的loading-inject轉換和走樣時間。
樣品處理：所有樣品需經過濾后才可進樣。進樣后按照設定的方法進行分析，并在完成后記錄數(shù)據和做標記[postrun]，最后再用基線方法洗掉剩余物。
4、維護保養(yǎng)
環(huán)境條件：保持儀器工作環(huán)境干凈、溫度適宜，避免振動和陽光直射。
定期檢查：定期檢查和維護泵、檢測器及管路，確保沒有泄漏或堵塞。
清洗部件：定期清洗泵、閥門和檢測器等關鍵部件，保持其清潔無污染。
